II. Re­agen­zi­en und Ge­rä­te

Nach­weis von p53-An­ti­kör­pern in Pa­ti­en­ten­se­ren - Alarm­stu­fe rot: Wel­ches Serum ist ver­däch­tig?

Re­agen­zi­en:

• An­ti­gen-Lö­sung : h-p53 = re­kom­bi­nan­tes, mensch­li­ches Tu­mor­sup­pres­sor-Pro­te­in p53 in ge­rei­nig­ter Form
• Block-Lö­sung : 5% Milch­pul­ver in Wasch­puf­fer
• Serum P (= Po­si­tiv-Kon­trol­le): mensch­li­ches Serum mit p53-An­ti­kör­pern
• 6 Pa­ti­en­ten­se­ren A bis F, für die zu be­stim­men ist, ob p53-An­ti­kör­per nach­weis­bar sind Ver­dün­nungs­puf­fer: Ca­sein 2 mg/ml in PBS-Tween
  (PBS = Phos­phat ge­puf­fer­te phy­sio­lo­gi­sche Salz­lö­sung pH 7,4, Tween20 = De­ter­genz)
• Anti-Hu­man­lgG-Pox : Anti-Mensch-lm­mun­glo­bu­lin-An­ti­kör­per mit Per­oxi­da­se ge­kop­pelt, 1:10 000 ver­dünnt
• Wasch­puf­fer : PBS-Tween
• Sub­strat­lö­sung : 100 g/ml TMB, 0,1Cml H 202 in 0,1 M Na­tri­um­ace­tat-Puf­fer pH 6,0
  (TMB = 3,3',5,5'-Ie­tra­me­thyl­ben­zi­di­ne, H202 = Was­ser­stoff­per­oxid)
• Stopp­lö­sung : 1 M Salz­säu­re

Plas­tik und Ge­rä­te:

• Re­ak­ti­ons­ge­fä­ße, Stän­der für Re­ak­ti­ons­ge­fä­ße, Mi­kro­pi­pet­ten 2-20p20-200p200-1000p
• Pa­pier­hand­tü­cher, Pi­pet­ten­spit­zen, Hand­schu­he, Schutz­bril­len, Re­agen­zi­en­scha­len

Wei­ter: Ar­beits­schrit­te