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II. Reagenzien und Geräte

Nachweis von p53-Antikörpern in Patientenseren - Alarmstufe rot: Welches Serum ist verdächtig?

Reagenzien:

  • Antigen-Lösung : h-p53 = rekombinantes, menschliches Tumorsuppressor-Protein p53 in gereinigter Form
  • Block-Lösung : 5% Milchpulver in Waschpuffer
  • Serum P (= Positiv-Kontrolle): menschliches Serum mit p53-Antikörpern
  • 6 Patientenseren A bis F, für die zu bestimmen ist, ob p53-Antikörper nachweisbar sind Verdünnungspuffer: Casein 2 mg/ml in PBS-Tween
    (PBS = Phosphat gepufferte physiologische Salzlösung pH 7,4, Tween20 = Detergenz)
  • Anti-HumanlgG-Pox : Anti-Mensch-lmmunglobulin-Antikörper mit Peroxidase gekoppelt, 1:10 000 verdünnt
  • Waschpuffer : PBS-Tween
  • Substratlösung : 100 g/ml TMB, 0,1Cml H 202 in 0,1 M Natriumacetat-Puffer pH 6,0
    (TMB = 3,3',5,5'-Ietramethylbenzidine, H202 = Wasserstoffperoxid)
  • Stopplösung : 1 M Salzsäure

Plastik und Geräte:

  • Reaktionsgefäße, Ständer für Reaktionsgefäße, Mikropipetten 2-20p20-200p200-1000p
  • Papierhandtücher, Pipettenspitzen, Handschuhe, Schutzbrillen, Reagenzienschalen

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