II. Reagenzien und Geräte
Nachweis von p53-Antikörpern in Patientenseren - Alarmstufe rot: Welches Serum ist verdächtig?
Reagenzien:
- Antigen-Lösung : h-p53 = rekombinantes, menschliches Tumorsuppressor-Protein p53 in gereinigter Form
- Block-Lösung : 5% Milchpulver in Waschpuffer
- Serum P (= Positiv-Kontrolle): menschliches Serum mit p53-Antikörpern
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Patientenseren
A bis F, für die zu bestimmen ist,
ob p53-Antikörper
nachweisbar sind
Verdünnungspuffer: Casein 2 mg/ml in PBS-Tween
(PBS = Phosphat gepufferte physiologische Salzlösung pH 7,4, Tween20 = Detergenz) - Anti-HumanlgG-Pox : Anti-Mensch-lmmunglobulin-Antikörper mit Peroxidase gekoppelt, 1:10 000 verdünnt
- Waschpuffer : PBS-Tween
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Substratlösung
: 100 g/ml TMB, 0,1Cml H 202 in 0,1
M Natriumacetat-Puffer pH 6,0
(TMB = 3,3',5,5'-Ietramethylbenzidine, H202 = Wasserstoffperoxid) - Stopplösung : 1 M Salzsäure
Plastik und Geräte:
- Reaktionsgefäße, Ständer für Reaktionsgefäße, Mikropipetten 2-20p20-200p200-1000p
- Papierhandtücher, Pipettenspitzen, Handschuhe, Schutzbrillen, Reagenzienschalen
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