Ma­te­ri­al 5a: Lö­sung

Auf­ga­be

Ab­bil­dung er­stellt durch Frank Har­der, ZPG Bio­lo­gie

Die be­stell­te guide-RNA ist zum Be­reich der DNA, in wel­chem der Dop­pel­strang­s­chnitt er­fol­gen soll, kom­ple­men­tär. Da­durch wird der CRIS­PR-Cas9-Kom­plex an diese Se­quenz bin­den und einen Dop­pel­strang­s­chnitt an der Gren­ze von In­tron-4- zu Exon 5- durch­füh­ren

Die DNA, die für die ho­mo­lo­ge Re­kom­bi­na­ti­on be­stellt wurde, be­sitzt ho­mo­lo­ge Be­rei­che, die denen der Be­rei­che um die Schnitt­stel­le herum ent­spre­chen (ho­mo­lo­ge Rand­be­rei­che). Da die Spleiß­stel­le vor Exon-5 für die Splei­ßen­zy­me nicht mehr er­kenn­bar sein darf, ist die­ser Be­reich durch Ein­fü­gen einer stark ab­ge­än­der­ten Ba­sen­se­quenz un­kennt­lich ge­macht.

Ab­bil­dung er­stellt durch Frank Har­der, ZPG Bio­lo­gie

So­fern die Schnitt­stel­le mit­hil­fe ho­mo­lo­ger Re­kom­bi­na­ti­on re­pa­riert wird, ist der In­tron-4-Exon-5-Über­gang nicht mehr er­kenn­bar. Da­durch wird aus der prä-mRNA Exon-5 zu­sam­men mit In­tron-4 her­aus­gespleißt, so­dass kein funk­tio­na­les dsx-fe­ma­le mehr ent­ste­hen kann. Da­durch ist die Bil­dung fer­ti­ler Weib­chen nicht mehr mög­lich.

Ab­bil­dung er­stellt durch Frank Har­der, ZPG Bio­lo­gie

Ma­te­ri­al 5a: Lö­sung: Her­un­ter­la­den [docx][446 KB]

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Wei­ter zu Ma­te­ri­al 5b