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Arbeitsblatt: Chlorophyllextraktion und Dünnschichtchromatografie

Beispiellösung

 

Versuchsanleitung

Materialien

Geräte

  

Mörser

Erlenmeyerkolben (lichtdicht → mit Alufolie umwickelt und Alufoliendeckel)

Trichter mit Filter

Messzylinder

Messpipette mit Pipettierhilfe

DC-Kammer mit Deckel

Blockschälchen

Glaskapillare

DC-Chromatographieplatte (Kieselgel)

Richten Sie Ihren Arbeitsplatz mit den genannten Geräten ein.

Lesen Sie die Versuchsanleitung vollständig, bevor Sie mit der Versuchsdurchführung beginnen.
Verbrauchsmaterialien, Chemikalien Gefahren und Schutzmaßnahmen

Spinatblätter

Seesand

Aceton

Petrolether (40°-70°)

Petrolether (100°-140°)

2-Propanol
Warnhinweise

  • Schutzbrille und Schutzhandschuhe tragen

  • Auf gute Belüftung achten

  • Alle Gefäße, die Chemikalien enthalten sofort fest verschließen

Durchführung

1. Herstellung einer Rohchlorophyll-Lösung

  1. Zerreiben Sie im Mörser eine Hand voll klein geschnittener Spinatblätter zusammen mit einem Löffel Seesand. Fügen Sie nach und nach 20 ml Aceton zu1.
  2. Filtrieren Sie die so hergestellte Rohchlorophyll-Lösung durch einen Trichter mit Papierfilter in den Erlenmeyerkolben2.

2. Chromatographie

  1. Zeichnen Sie mit Bleistift eine Markierung in 1,5 cm Abstand zu einer der kurzen Seiten der DC-Platte.
  2. Befüllen Sie die DC-Kammer mit 5 ml Petrolether (40°-70°) + 5 ml Petrolether (100°-140°) + 1 ml 2-Propanol (Kammer stets sofort fest verschließen!)3.
  3. Gießen Sie eine kleine Menge der Rohchlorophyll-Lösung in das Blockschälchen.
  4. Benutzen Sie die Glaskapillare, um eine kleinstmögliche Menge der Lösung circa 2 mm oberhalb der Bleistiftmarkierung auf die DC-Platte aufzutragen. Lassen Sie die Auftragsstelle trocknen. Wiederholen Sie diesen Vorgang noch fünf Mal an der selben Stelle (jedesmal trocknen lassen!).
  5. Stellen Sie die DC-Platte mit der Bleistiftmarkierung nach unten in die DC-Kammer mit dem Laufmittel. Die Auftragsstelle und die Bleistiftmarkierung darf nicht mit dem Laufmittel in Berührung kommen!
  6. Beobachten Sie die Auftrennung der Blattfarbstoffe und entnehmen Sie die DC-Platte, wenn die oberste Bande kurz vor dem Ende der Platte zu sehen ist.

3. Abschluss und Dokumentation des Experiments

  1. Fotografieren Sie Ihre DC-Platte direkt nach der Entnahme aus der Kammer (die Banden verblassen!)
  2. Stellen Sie die fest verschlossene DC-Kammer auf das Lehrerpult.
  3. Gießen Sie Ihre Rohchlorophyll-Lösung in das dafür vorgesehene Gefäß auf dem Lehrerpult.
  4. Waschen Sie alle anderen Geräte ab und reinigen Sie Ihren Arbeitsplatz.
  5. Zeichnen Sie Ihr Chromatogramm ab und vergleichen Sie es mit dem Beispiel.
  6. Beschreiben Sie kurz das Ergebnis Ihres Experiments.

 

1Durch den Seesand werden die Zellwände zerstört → Freilegung der Chloroplasten mit dem enthaltenen Chlorophyll. Das Aceton dient als Extraktionsmittel für die Blattfarbstoffe.

2Chlorophyll ist lichtempfindlich, deshalb den Erlenmeyerkolben mit Aluminiumfolie umwickeln und mit einem Alu-Deckel versehen.

3Diese Mischung dient als Laufmittel, in dem die gelösten Blattfarbstoffe, nach Größe, Haftfähigkeit und Ladung aufgetrennt, durch die DC-Platte transportiert werden.

 

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Arbeitsblatt: Chlorophyllextraktion und Dünnschichtchromatografie: Herunterladen [pdf][251 KB]

 

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